通过人工干预提高细胞内miRNA的表达水平是miRNA研究最常用的技术手段。研究者可以通过转染miRNA类似物(miRNA mimic) 或pre-/pri-miRNA表达质粒以提高细胞内miRNA水平。研究表明，转染含有pre-miRNA及其两端侧翼序列(各100-200 bp)的pri-miRNA表达载体，能在最大程度上模拟miRNA在体内的合成过程，因此被众多研究者青睐。Geneup公司设计的miRNA过表达载体，分为组成型和诱导型两类。
（一）miRNA过表达载体
1. pLVc-200 (pLVc/CMV-EGFP.miRNA)：miRNA组成型过表达载体
载体特征：
u 用CMV启动子驱动下游标记蛋白EGFP及miRNA的共表达；
u 共表达的EGFP可快速便捷地检测转染或感染效率；
u 既可用于瞬时转染，也可包装成慢病毒感染细胞；
u 与第四代慢病毒包装质粒匹配，可制备高滴度慢病毒颗粒；
u 含有嘌呤霉素（puromycin）抗性筛选基因，可筛选稳定表达细胞系。
载体图谱：
2. pLVi-201 (pLVi/TRE3G-RFP.miRNA)：miRNA诱导型过表达载体
载体特征：
u 将新一代四环素反应元件（TRE3G）和四环素激活因子（TetON3G）反向克隆到同一慢病毒载体，能显著提高诱导效果，并降低本底；
u 用红色荧光蛋白（RFP）作为报告基因，只有在添加强力霉素（DOX）情况下，RFP及其下游的miRNA才能共表达；
u 既可用于瞬时转染，也可包装成慢病毒感染细胞；
u 与第四代慢病毒包装质粒匹配，可制备高滴度慢病毒颗粒；
u 含有嘌呤霉素（puromycin）抗性筛选基因，可筛选稳定表达细胞系。
载体图谱：
3. pLVi-202 (pLVi/TETO7-RFP.miRNA)：miRNA诱导型过表达载体。
载体特征：
u 将第三代四环素反应元件（TETO7）和四环素激活因子（rtTA3）同向克隆在慢病毒载体；
u 用红色荧光蛋白（RFP）作为报告基因，只有在添加强力霉素（DOX）情况下，RFP及其下游miRNA才能共表达；
u 既可用于瞬时转染，也可包装成慢病毒感染细胞；
u 与第四代慢病毒包装质粒匹配，可制备高滴度慢病毒颗粒；
u 含有嘌呤霉素（Puromycin）抗性筛选基因，可筛选稳定表达细胞系。
载体图谱：
miRNA表达文库 Geneup公司拥有由700多个最常见人源pri-miRNA过表达载体组成的miRNA表达文库。如果下表中没有您需要的miRNA，可以委托本公司定制。
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