腺病毒表达系统，可以通过可复制的缺陷腺病毒颗粒，感染分裂或非分裂的哺乳动物细胞，介导外源核酸片段进入并在细胞内瞬时表达。本系统以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架，在克隆、包装、扩增等方面做了改进和优化，达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、产毒迅速、滴度高等效果。所包装的腺病毒已成功应用于信号转导，基因转位，Co-IP，动物实验，干细胞研究等科研实验。
系统组成
u 表达载体：包括pENTR和Ad载体，可表达cDNA，miRNA，shRNA，lncRNA等；
u
u 可以根据需要，选择组成型或诱导型表达载体。
系统优势
u 包装容量大：包装容量可以达到8kb；
u 宿主范围广：可以广泛感染分裂和非分裂的哺乳动物细胞；
u 病毒滴度高：未浓缩的病毒原液病毒滴度可高达1 X 1010 pfu/ml；
u 病毒可扩增：包装好的病毒可以在293A细胞系中进行扩增。
腺病毒包装流程：
腺病毒载体选择：
一）、目的蛋白基因慢病毒过表达载体
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Vector Cat# |
FM No. |
Promoter |
Feature |
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pEA100 |
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CMV |
CMV-cDNA-polyA, no tag |
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pEA101 |
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CMV |
CMV-FLAG-cDNA-polyA |
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pEA102 |
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CMV |
CMV-HA-cDNA-polyA |
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pEA103 |
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CMV |
CMV-cMyc-cDNA-polyA |
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pEA104 |
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CMV |
CMV-cDNA-P2A-EGFP-polyA |
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pEA105 |
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CMV |
CMV-cDNA-P2A-RFP-polyA |
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pEA106 |
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TETO6* |
TETO6-cDNA-Ubc-rtTA3 |
*DOX诱导型表达体系
二）、pri-miRNA腺病毒过表达载体
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Vector Cat# |
FM No. |
Promoter |
Feature |
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pEA200 |
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CMV |
CMV-EGFP-miRNA |
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pEA201 |
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CMV |
CMV-RFP-miRNA |
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pEA202 |
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TETO6* |
TETO6-RFP-miRNA-Ubc-rtTA3 |
*DOX诱导型表达体系
三）、dTuD (miRNA抑制体) 腺病毒过表达载体
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Vector Cat# |
FM No. |
Promoter |
Feature |
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pEA210 |
#3563 |
U6/H1 |
TuD-U6-H1-TuD-EF1a-copGFP-polyA |
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pEA211 |
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U6/7sk |
U6-TuD-TuD-7sk- EF1a-copGFP-polyA |
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pEA212 |
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U6/7sk |
U6-TuD-TuD-7sk- EF1a-RFP-polyA |
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pEA213 |
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U6/7sk |
U6-TuD-TuD-7sk |
四）、shRNA 腺病毒干扰载体（靶向mRNA or lncRNA）
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Vector Cat# |
FM No. |
Promoter |
Feature |
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pEA300 |
#3563 |
U6 |
U6-shRNA-CMV-EGFP-polyA |
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pEA301 |
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mU6/7sk |
mU6-shRNA1-shRNA2-7sk-CMV-EGFP-polyA |
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pEA302 |
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CMV |
CMV-EGFP-miR30shR-polyA |
